第一篇 DNA重组技术
第一部分 DNA的提取与鉴定
实验一 溶液的配制与器材的准备
实验二 质粒DNA的提取与检测
实验三 琼脂糖凝胶电泳法检测DNA
实验四 聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测DNA
第二部分 目的基因的制备与纯化
实验五 PCR技术扩增目的基因
实验六 反转录PCR技术扩增 目的基因
实验七 目的基因的回收与纯化
第三部分 DNA的酶切与载体的构建
实验八 目的基因与质粒DNA的酶切分析
实验九 目的基因与质粒载体的连接与转化
实验十 重组质粒的鉴定
第二篇 外源基因在大肠杆菌中的表达与检测
实验十一 大肠杆菌表达载体的设计与构建
实验十二 重组蛋白的诱导表达与SDS-PAGE检测
实验十三 重组蛋白的分离纯化
实验十四 重组蛋白的活性分析
第三篇 转基因植物的制作与检测
实验十五 农杆菌介导法制作转基因烟草
实验十六 植物基因组DNA的提取与检测
实验十七 植物总RNA的提取与检测
实验十八 Southern杂交检测外源基因的整合
实验十九 Northern杂交检测外源基因的转录
实验二十 RT-PCR或qRT-PCR技术检测外源基因的转录
实验二十一 报告基因表达产物GUS的检测
实验二十二 Western 杂交检测外源基因的表达
第四篇 重组干状病毒篇
实验二十三 重组杆状病毒的构建与制备
实验二十四 重组杆状病毒介导的蛋白质亚细胞定位
实验二十五 重组杆状病毒感染家蚕幼虫
第五篇 基因编辑篇
实验二十六 sgRNA的选择和引物设计
实验二十七 植物CRISPR/Cas9 载体构建及基因敲除
实验二十八 sgRNA的活性检测(Surveyor法)
第六篇 开放性实验
实验二十九 利用分子生物学技术鉴定纤维素降解微生物
实验三十 利用 DNA 分子标记技术分析学生群体的遗传多样性
附录
附录Ⅰ 常用培养基、试剂和缓冲液的配制
附录Ⅱ 核酸和蛋白质数据
附录Ⅲ 本书所用大肠杆菌菌株
附录Ⅳ 常用分子生物学软件的使用
参考文献